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標(biāo)準(zhǔn)曲線怎么做不好?

更新時(shí)間:2017-04-11      瀏覽次數(shù):1396

標(biāo)準(zhǔn)曲線怎么做不好?

1、剛加完顯色劑時(shí)梯度明顯:顯色液是不是從高濃度向低濃度孔加的啊,哈哈。
2、是不是酶濃度太高,導(dǎo)致zui后顯色結(jié)果都是高的
3、包被-酶標(biāo)系統(tǒng)不匹配或者酶標(biāo)的非特異反應(yīng)太強(qiáng),或者酶標(biāo)儀讀數(shù)范圍不夠,或者干脆酶標(biāo)儀壞了
4、樣本中有能夠催化底物的物質(zhì),沒洗下來。
5、建議:包被、酶標(biāo)重新做梯度,先用較低的濃度把梯度摸索好,然后再優(yōu)化靈敏度,zui后調(diào)出所需的靈敏度、線性范圍
6、有條件的話,可以把酶免的蛋白系統(tǒng)移植到板式化學(xué)發(fā)光上,加完底物三分鐘讀數(shù),這樣可能比較適合你。
7、蛋白系統(tǒng)靈敏度夠的話,顯色十分鐘就差不多了。
8、酶是自己標(biāo)的么,見過有人把酶給標(biāo)壞了出現(xiàn)這種情況的,HRP的話,比例不要太高,酶掛的太多了也不好的。

鈺博技術(shù)答:1,用排槍同時(shí)加顯色液,樣品濃度太高,都飽和了。

           2, 試試不同的H2SO4濃度,或者其他的酸。

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